针对培养过程中面临的各种污染源,各霉菌培养箱微生物的控制方式和效果不尽相同,对于细胞来说,非常理想的培养环境同样也适合这些污染物的生存,培养箱本身是不会辨别的,而细胞培养中大部分时间里细胞都是位于培养箱内,因此箱体内能否抑菌或灭菌非常关键!
培养箱微生物污染的原因:
1,取放细胞时引起的污染
细胞培养过程中,取放细胞是最基本的操作,培养房开关门的瞬间,环境中的微生物或多或少会进入培养箱中,而且内外温差导致内门冷凝水的产生,极易吸附微生物,都是造成培养箱污染的风险因素。
2,灭菌不*造成的二次污染
细胞培养过程中,因其它操作问题(如培养基泼洒,水盘污染等),造成培养房的大规模污染也时常会发生,此时就需要对培养箱进行灭菌消毒,常规的消毒(如紫外照射)只能达到表面消毒的效果,特别是对真菌等顽固性污染,无法进行*灭菌,导致后续培养过程中细胞污染频发。
如何有效避免污染?
1.重视细胞房管理工作,规范操作
定期进行细胞房清洁消毒工作,规范实验人员操作(如身着白大褂、换鞋等),创造洁净培养环境。
2.避免频繁查看细胞
做好实验规划,减少培养箱门开关的频率,取放细胞时需佩戴洁净的手套,并用少量的70%医用酒精(过多会导致培养箱中残留乙醇蒸汽)擦拭培养瓶/皿表面,从而降低细胞培养箱污染的风险;
3.定期维护和灭菌,预防污染
定期清洁维护,培养箱内用水灭菌后使用并定期更换,选择培养箱时,可优先考虑有自动灭菌功能的培养箱。细胞房一旦发生污染,及时进行消毒灭菌工作。